Biolife Green I是一種結(jié)合于dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)光的熒光染料。Biolife GreenI與dsDNA結(jié)合后熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800-1000倍,是一種常用的qPCR熒光染料。該染料經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、使用方便,具有高靈敏度,信噪比高等優(yōu)勢(shì),可應(yīng)用于基因表達(dá)差異分析,基因芯片等。
1. Biolife GreenI的使用濃度是保證熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素。染料濃度過(guò)低會(huì)使熒光信號(hào)變化降低,導(dǎo)致低拷貝的樣品可能無(wú)法檢出,而在高濃度時(shí)又會(huì)抑制PCR反應(yīng)。所以一般在使用Biolife Green染料時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化使用濃度,反應(yīng)的終濃度為1×到0.2×之間。
2. 提高M(jìn)g2+濃度可以降低Biolife GreenI對(duì)PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用Biolife GreenI進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)時(shí),Mg2+濃度比無(wú)Biolife GreenI的普通PCR反應(yīng)高出0.5~3mM。
3. 為了您的健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套進(jìn)行操作。