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UE-H9043◆金牌胎牛血清的胎牛檢測過那些病毒？BVDV、PI3、BAV-3、BPV、REO3、Rabies◆如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。注意融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，若存放于4℃時，請勿超過一個月。長期保存推薦在-20℃以下，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍，并避免反復(fù)凍融。◆有時在血清中見到的絮狀沉淀可能是些什么物質(zhì)？主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量，可用400 xg離心5 min去除，也可不用處理。◆如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(2) 血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。(6) 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。◆為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，肥大細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。◆細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。◆細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。(3) 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0- 7.2。(4) 嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。(5) 掌握細胞傳代的最佳時機，細胞切勿生長過老。
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