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ThermoScientificNE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的細胞裂解和抽提方法,可在兩個小時之內(nèi)完成胞漿蛋白與核蛋白的分離操作。NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒的特性:? 快速—在兩個小時之內(nèi)獲得胞核與胞漿內(nèi)的可溶性蛋白組分? 可靠—NE-PER試劑盒已經(jīng)被950篇以上的發(fā)表文獻引用? 通用 –適用于培養(yǎng)細胞或組織(僅適用于新鮮樣本)的核蛋白抽提? 可擴展—兩種規(guī)格試劑盒,滿足從細胞和組織中抽提樣本的應用需求? 方便—操作簡單,無需超速梯度離心? 兼容性好—獲得樣本適合于多種下游應用,包括免疫印跡、凝膠遷移分析、蛋白分析、報告基因分析以及酶活性分析NE-PER試劑盒為用戶提供了高效的核蛋白抽提方法,用戶只需擁有臺式微量離心機、離心管和移液器,進行簡單的分步式細胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分,交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了最低。一旦經(jīng)過脫鹽或稀釋,分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實驗,如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀(Co-IP)和拉下實驗。分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多,但大多數(shù)制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時,并需要機械勻漿、凍融循環(huán)、反復離心或透析,而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案,能夠分步裂解細胞并從胞漿中分離出完整的細胞核,然后再從基因組DNA與mRNA中抽提核蛋白。這一溫和的過程可在兩小時之內(nèi)完成,且使用培養(yǎng)細胞時僅需標準的桌臺式離心機即可。此外,用戶還可以從細胞培養(yǎng)物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。本試劑盒能夠從兩百萬個細胞中提出200至500μg胞漿蛋白和100至200μg的核蛋白(濃度為1mg/mL)。一般情況下,胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在10%左右。本方法分離得到的主要是細胞核中的可溶蛋白,而非與染色質(zhì)結(jié)合的蛋白或核膜整聯(lián)蛋白??赏ㄟ^調(diào)整核抽提試劑(NER)的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度,而不會對抽提效率造成顯著影響。從細胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調(diào)控研究的關鍵,然而現(xiàn)有的許多分離細胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時,且需要進行機械勻漿、凍融循環(huán)、重復離心或透析等操作,對許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER試劑盒能夠克服這些問題,通過EMSA及其他分析技術為用戶提供高質(zhì)量的濃縮核蛋白抽提物。
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